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Die Nachkommenschaften der F2-Männchen werden durchgesehen. Wenn der gesuchte Phänotyp gefunden wird, dann wurde ein neues Allel des Gens mit P-Element-Insertion isoliert. Die Mutanten selbst sind zwar nicht lebensfähig, aber alle ihre heterozygoten Geschwister, die rosy+ sind, tragen die gleiche Insertion. Sie können weiter verwendet werden, um das Gen zu isolieren.
Beachten: Nicht alle möglichen Genotypen der F3-Generation sind gezeigt.